Hogyan kell használni a külső standard módszert a gázkromatográfiában?

A külső standard módszer a gázkromatográfiában (GC) széles körben alkalmazott kvantitatív elemzési technika. Gázkromatográf szállítóként jól ismerem ennek a módszernek az alapelveit és alkalmazásait. Ebben a blogban végigvezetem Önt a külső standard módszer gázkromatográfiában történő alkalmazásának folyamatán, a minta-előkészítéstől az adatelemzésig.

A külső szabványos módszer megértése

A külső standard módszer azon az elven alapul, hogy egy vegyület csúcsterülete vagy csúcsmagassága a kromatogramon arányos a mintában lévő koncentrációjával. Ennek a módszernek a használatához egy sor standard oldatot készítünk a célvegyület ismert koncentrációival. Ezeket a standardokat ezután a gázkromatográfba fecskendezik, és megmérik a megfelelő csúcsterületeket vagy -magasságokat. A kalibrációs görbét úgy készítjük el, hogy a csúcsterületeket vagy magasságokat a standardok ismert koncentrációihoz viszonyítva ábrázoljuk. A kalibrációs görbe felállítása után a célvegyület koncentrációja egy ismeretlen mintában meghatározható a csúcsterület vagy magasság mérésével és a kalibrációs görbére való hivatkozással.

1. lépés: Minta- és standard előkészítés

• A standard vegyületek kiválasztása: Válasszon tiszta standard vegyületeket, amelyek reprezentatívak a célanalitokra. A szabványok tisztaságának a lehető legmagasabbnak kell lennie a pontos eredmények biztosítása érdekében. Például, ha illékony szerves vegyületeket (VOC) elemez, akkor megbízható beszállítóktól szerezhet be nagy tisztaságú VOC szabványokat.
• Standard megoldások készítése: Készítsen egy sor standard oldatot különböző koncentrációkkal. Ezt úgy lehet megtenni, hogy a standard vegyület törzsoldatát megfelelő oldószerrel hígítjuk. Például, ha nem poláros oldószert, például hexánt használ, győződjön meg arról, hogy a standard vegyület oldódik benne. A standard oldatok koncentrációinak le kell fedniük az ismeretlen mintákban lévő célvegyület várható koncentrációtartományát.
• Minta előkészítés: A minta előkészítési folyamata a minta jellegétől függ. Folyékony minták esetén szükség esetén megfelelő hígítás után közvetlenül befecskendezhetők a gázkromatográfba. Szilárd minták esetében előfordulhat, hogy megfelelő oldószerrel extrahálni kell azokat az injekció előtt. Például, ha egy talajmintát peszticidek keresésére vizsgál, kivonhatja a peszticideket szerves oldószerrel, például acetonnal.

2. lépés: A műszer beállítása

• Oszlop kiválasztása: Válasszon megfelelő oszlopot a célvegyületek elválasztásához. Az oszlopnak jó szelektivitással és felbontással kell rendelkeznie a kérdéses analitokhoz. Például egy meghatározott állófázisú kapillárisoszlop kiválasztható a célvegyületek polaritása alapján. Ha nem poláris vegyületeket elemez, megfelelő lehet egy nem poláris oszlop, például egy DB - 1 vagy HP - 5 oszlop.
• Carrier Gas: Válasszon megfelelő vivőgázt, például héliumot vagy nitrogént. A vivőgáz áramlási sebességét optimalizálni kell a jó elválasztás és reprodukálhatóság érdekében. Az áramlási sebesség az oszlop méreteinek és az analit típusának megfelelően állítható.
• Hőmérséklet program: Állítsa be a gázkromatográf hőmérsékleti programját. A kezdeti hőmérsékletet, a felfutási sebességet és a végső hőmérsékletet optimalizálni kell a vegyületek jó elválasztása érdekében. Például különböző forráspontú vegyületek összetett keveréke esetén hőmérséklet-gradiens alkalmazható a vegyületek ésszerű időn belüli eluálására.

3. lépés: A szabványok beadása

• Injekciós térfogat: Határozza meg a szabványoknak megfelelő injekciós térfogatot. A pontos eredmény érdekében az injekció térfogatának minden injekciónál azonosnak kell lennie. A gázkromatográfiás befecskendezési térfogat általában 0,1-10 μL.
• Injekciós technika: Használjon megfelelő injekciós technikát, például osztott vagy osztott injekciót. Az osztott injekciós befecskendezés nagy koncentrációjú mintákhoz, míg az osztott injektálás az alacsony koncentrációjú mintákhoz alkalmasabb.
• A szabványok futtatása: Fecskendezzünk minden standard oldatot a gázkromatográfba, és jegyezzük fel a kromatogramokat. A reprodukálhatóság érdekében minden szabványt legalább háromszor futtasson le. Minden egyes kromatogramon mérje meg a célvegyület csúcsterületét vagy magasságát.

4. lépés: A kalibrációs görbe felépítése

• Adatelemzés: Használja a standardok csúcsterületeit vagy magasságait és a hozzájuk tartozó ismert koncentrációkat a kalibrációs görbe felépítéséhez. A lineáris regresszió végrehajtásához használhatja a gázkromatográfhoz mellékelt szoftvert vagy más adatelemző szoftvert. A kalibrációs görbének jó lineáris kapcsolatnak kell lennie, általában 1-hez közeli korrelációs együtthatóval (R²).
• A kalibrációs görbe egyenlete: A kalibrációs görbe elkészítése után kapja meg az egyenes egyenletét y = mx + b alakban, ahol y a csúcs területe vagy magassága, x a koncentráció, m a meredekség és b a metszéspont.

5. lépés: Az ismeretlen minták elemzése

• Az ismeretlen minták befecskendezése: Fecskendezze be az ismeretlen mintákat a gázkromatográfba ugyanazzal a befecskendezési térfogattal és technikával, mint a standardoknál.
• A csúcsterületek vagy magasságok mérése: Mérje meg a célvegyület csúcsterületét vagy magasságát az ismeretlen minták kromatogramjaiban.
• A koncentráció meghatározása: Használja a kalibrációs görbe egyenletét az ismeretlen mintákban lévő célvegyület koncentrációjának kiszámításához. Helyettesítse be a mért csúcsterületet vagy magasságot az egyenletbe, és oldja meg a koncentrációt.

6. lépés: Minőségellenőrzés

• Ismételhetőség: Az eredmények megbízhatóságának biztosítása érdekében rendszeres időközönként futtasson minőség-ellenőrzési mintákat. Ezeknek a mintáknak ismert koncentrációjúaknak kell lenniük, és azokat ugyanúgy kell elemezni, mint az ismeretlen mintákat. A minőség-ellenőrzési minták eredményeinek elfogadható tartományon belül kell lenniük.
• Helyreállítási tesztek: Végezzen visszanyerési teszteket úgy, hogy ismert mennyiségű célvegyületet adjon a mintákhoz. Számítsa ki a helyreállítási arányt, amelynek közel 100%-nak kell lennie. Ha a visszanyerési arány kívül esik az elfogadható tartományon, problémák adódhatnak a minta előkészítésével vagy az elemzési módszerrel.

Gázkromatográf termékeink

Gázkromatográf szállítóként széles választékot kínálunkKromatográfiás berendezésekelemzési igényeinek kielégítésére. A miénkGC - 06E gázkromatográfegy nagy teljesítményű műszer olyan fejlett funkciókkal, mint a precíz hőmérséklet-szabályozás és a nagy érzékenységű érzékelők. Számos alkalmazásra alkalmas, beleértve a környezeti elemzést, az élelmiszerbiztonságot és a gyógyszerészeti elemzéseket.

A miénkGC analizátoregy másik kiváló termék, amely pontos és megbízható eredményeket biztosít. Könnyen kezelhető és karbantartható, így a felhasználók körében népszerű választás.

Vásárlásért forduljon hozzánk

Ha felkeltette érdeklődését gázkromatográfiás termékeink, és szeretne többet megtudni arról, hogyan használhatja a külső standard módszert műszereinkkel kombinálva, vagy ha bármilyen egyéb kérdése van a gázkromatográfiás elemzéssel kapcsolatban, forduljon hozzánk bizalommal vásárlási tanácsadásért. Szakértői csapatunk készséggel segít Önnek megtalálni a legmegfelelőbb megoldást az elemzési igényeinek.

Hivatkozások

• McNair, HM és Miller, JM (1997). Alapvető gázkromatográfia. Wiley – Interscience.
• Poole, CF (2003). A kromatográfia lényege. Elsevier.